操作需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行，穿戴防护装备并规范处理废弃物（建议使用1% SDS或70℃加热灭活）。病毒液避免反复冻融，解冻时需置于常温或4℃缓慢溶解，短暂4℃保存不超过24小时。感染细胞时建议优化MOI值（通常为5~50），加入聚凝胺（Polybrene，终浓度4~8 μg/mL）以提高感染效率。

病毒颗粒长期保存需置于-80℃，冻融后立即使用（不能反复冻融），运输时需使用干冰。慢病毒建议在一年内使用，活性衰减后需重新测定滴度。

慢病毒颗粒由第二代包装系统（pMD2.G、psPAX2）在Lenti-X 293T细胞中生产，预分装为非浓缩版（约2-5*10^6 TU/mL）和浓缩版高滴度病毒液（约2-5*10^7 TU/mL），提供Cas9、dCas9VPR和dCas9-KRAB三种类型，Blasticidin抗性。